整理匯總比較熱門的人間充質干細胞無血清培養基。

MSC人間充質干細胞無血清培養基

——廣泛使用的幾種人間充干細胞無血清培養基

人間充質干細胞培養一開始使用基礎培養基（DMEM，DMEM-F12等）配比牛血清的*培養基，因為牛血清作為異源物，可能會帶來病原體污染，此后有使用人血清、血小板裂解液和臍帶血清等作為替代，雖然也不能*免除威脅。血清和這些替代品還有一個缺點，都是天然產物，批次間并不穩定，不利于研究和臨床應用所需的一致性。

隨著臍帶華通氏膠MSC等各種間充質干細胞的發現，間充質干細胞能大量獲得，MSC治療發展后，培養基批次穩定、沒有污染是必要條件，商用的無血清培養基因而成為*選擇。

StemPro® MSC SFM無血清間充質干細胞培養基

產品英文名稱： CTS™ StemPro™ MSC SFM

產品中文名稱：StemPro™無血清間充質干細胞培養基

Gibco CTS™ StemPro™間充質干細胞培養基是無血清培養基，專為人間充質干細胞設計，相對于傳統的血清培養基，能顯著增強人間充質干細胞的擴增和一致性。使用該培養基人間充質干細胞可以擴展到5個形態，同時仍然保持他們的三系中胚層分化潛能(即:可分化成骨細胞、軟骨細胞和脂肪細胞)。每一批培養基用人間充質干細胞測試都合格；而且用血清培養基培養的人間充質干細胞可以轉移到StemPro™無血清間充質干細胞進行培養，不需要或者只需要很短的適應期。此外，該培養基還可以可以直接培養人類骨髓中的間充質干細胞。

MesenCult™人間充質干細胞培養基

產品英文名稱： MesenCult™-XF Medium，Defined, xeno-free medium for human mesenchymal stem cells

產品中文名稱：MesenCult™人間充質干細胞培養基

產品概述 MesenCult™-XF培養基是一款標準的，無異種成份，無血清培養基，設計用于人間充質干細胞（MSCs）培養。MesenCult™-XF Medium優化用于體外擴增間充質干細胞和使用集落形成單位-成纖維細胞（CFU-F）的細胞計數。MesenCult™-XF支持MSCs細胞長期生長和維護細胞多分化潛能。MesenCult™-XF Medium要與MesenCult™-XF Attachment Medium（#05424）和MesenCult™-ACF Dissociation Kit （#05426）一起使用。MesenCult™-XF Attachment Substrate 和 MesenCult™-ACF Dissociation Kit培養基成份經過篩分測試，在與MesenCult™-XF Medium一起使用時可提供*細胞貼附。MesenCult™-XF Medium使用時必需添加L-谷氨酰胺。

推薦應用：

• 人骨髓中分離的間充質干細胞的細胞增殖

• 間充質干細胞的長期培養（8代以上）

• 人骨髓分離的CFU-F和培養擴增的間充質干細胞的細胞檢測和計數

MesenGro人間充質干細胞培養基

產品英文名稱： StemRD MesenGro® Chemically Defined Medium for MSC

產品中文名稱：StemRD人間充質干細胞培養基

StemRD人間充質干細胞培養基用于從骨髓、臍帶血或脂肪組織中提取的人間充質干細胞的培養。StemRD人間充質干細胞培養基的原料來源是化學重組合成和純化得到。StemRD人間充質干細胞培養基是無異源性的因為沒有一種成分直接來自于非人類動物。

Lonza MSCGM-CD™  BulletKit 間充質干細胞培養基

產品英文名稱： TheraPEAK Chemically Defined Mesenchymal Stem Cell Growth Medium

產品中文名稱：人間充質干細胞培養基

Lonza MSCGM-CD™ 人間充質干細胞培養基是無血清培養基，專為人間充質干細胞設計，相對于傳統的血清培養基，能顯著增強人間充質干細胞的擴增和一致性。使用該培養基人間充質干細胞可以擴展到5個形態，同時仍然保持他們的三系中胚層分化潛能(即:可分化成骨細胞、軟骨細胞和脂肪細胞)。此外，該培養基還可以可以直接培養人類骨髓中的間充質干細胞。

LONZA 還有一款適合多種細胞類型的通用型無血清培養基，用來培養間充質干細胞市場反饋較好。

LONZA UltraCULTURE^TM Serum-free Medium是一種通用型無血清培養基，適用于培養貼壁和懸浮的哺乳動物細胞。適于在疫苗生產中制備病毒顆粒；支持雜交瘤形成時的細胞融合，支持單核細胞、巨噬細胞、上皮細胞和成纖維細胞系的細胞生長。適合多種細胞類型的無血清培養，包括HeLa、HEC、N-10、HNK、MB231等細胞。

Stemgro®  hMSC Mediu人間充質干細胞培養基

產品英文名稱： Corning® stemgro® hMSC Medium

產品中文名稱：康寧人間充質干細胞培養基

Corning® Stemgro®是一種無血清、無異種蛋白、化學成分明確的人間充質干細胞培養基。

更多間充質干細胞培養產品歡迎您咨詢重慶市華雅干細胞技術有限公司。重慶市華雅干細胞技術有限公司以“專注干細胞研究，提升干細胞品質”為發展理念，專業從事干細胞基礎研究、干細胞再生醫學臨床應用研究及干細胞技術服務。

推薦 HY StemCell 人間充質干細胞無血清培養基

中文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基

英文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM  Human MSCs Growth Medium

華雅干細胞開發的HY StemCell CCGmHum^TM 人間充質干細胞無血清培養基是成分確定、無血清、無動物源，無需鋪板膠的*培養基。適用臍帶或脂肪來源的人間充質干細胞的原代培養擴增。培養的hMSC可傳多代。細胞因子添加物中含有多種細胞生長因子、粘附蛋白、轉鐵蛋白、胰島素、微量元素和人白蛋白等成分。

附錄 三種zui熱門人間充質干細無血清培養基的比較StemPro MSC SFM MesenCult MSCGM-CD

1 StemPro MSC SFM 人間充質干細胞無血清培養基

是間充質干細胞的*種商用無血清培養基，而且已經被FDA批準作為醫療產品使用。

StemPro " MSC SFM"谷歌學術有250多篇。

“bone marrow”來源的間充質干細胞有200多篇。

“Adipose”脂肪來源的間充質干細胞有近200篇。

“umbilical cord”臍帶來源的間充質干細胞有近150篇。

2 StemCell MesenCult 人間充質干細胞無血清培養基

標準、無異源、無血清培養基，人間充質干細胞。

適用：骨髓來源的人間充質干細胞

CFU-F 分析

谷歌學術 Mesencult-XF有160多篇，2017有20多篇。

Mesencult有1000多篇。

Mesencult-XF+

骨髓來源的間充質干細胞 近140篇

脂肪來源的間充質干細胞 約100篇

臍帶來源的間充質干細胞 約100篇

3 LONZA TheraPEAK™ MSCGM-CD™ 人間充質干細胞無血清培養基

基本特點：無血清，成分確定，各種類型的間充質干細胞擴增培養。

另外聲稱細胞從有血清的培養基轉出來可以直接換LONZA的，不需要額外馴化。

MSCGM-CD是 Mesenchymal Stem Cell Growth Medium，Chemically Defined的縮寫，是LONZA的間充質干細胞無血清培養基的特定品牌。

用MSCGM-CD在谷歌學術上能搜到約100篇文獻。2017年就有20多篇。

再看下間充質干細胞來源三大幫各有多少篇：

骨髓來源的間充質干細胞 約80篇

脂肪來源的間充質干細胞 約60篇

臍帶來源的間充質干細胞 約60篇

過程中發現牙周膜間充質干細胞也蠻多的，有40多篇。

背景知識 不同來源的人間充質干細胞的分離及血清培養

人間充質干細胞的不同來源

人類骨髓來源間充質干細胞

新生兒臍帶來源間充質干細胞

新生兒臍帶血來源間充質干細胞

人類臍帶華通氏膠來源間充質干細胞

人類脂肪來源間充質干細胞

人類羊水來源間充質干細胞

人類牙髓來源間充質干細胞

人類皮膚來源間充質干細胞

新生兒胎盤來源間充質干細胞

人類唾液腺來源間充質干細胞

人類滑膜來源間充質干細胞

1 人類骨髓來源間充質干細胞

密度梯度離心骨髓，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類骨髓來源間充質干細胞分離

Ficoll密度梯度離心

人類骨髓來源間充質干細胞原代及傳代培養

Knock out DMEM，DMEM+10%FBS

2 新生兒臍帶來源間充質干細胞 新生兒臍帶血來源間充質干細胞

組織塊培養法、密度梯度離心法等處理臍帶、臍帶血，貼壁法原代培養間充質干細胞。

新生兒臍帶來源間充質干細胞 新生兒臍帶血來源間充質干細胞分離

Ficoll-Hypaque 密度梯度離心，酶消化法（0.25% 胰蛋白酶-EDTA），組織塊培養法

新生兒臍帶來源間充質干細胞 新生兒臍帶血來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM+10%FBS，10%FCS，MSCGM+10%FCS

3人類臍帶華通氏膠來源間充質干細胞

組織塊培養法、酶消化法處理華通氏膠，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類臍帶華通氏膠來源間充質干細胞分離

組織塊培養法, 酶消化法 (0.1% 膠原酶II,1 mg/ml 膠原酶B+胰蛋白酶, 膠原酶 +hyaluronidase +胰蛋白酶,胰蛋白酶-EDTA, 0.26% 膠原酶I+ 0.07% hyaluronidase+0.125% 胰蛋白酶)

人類臍帶華通氏膠來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM/DMEM-F12 + 10% FBS

4 人類脂肪來源間充質干細胞

酶消化法處理脂肪組織，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類脂肪來源間充質干細胞分離

酶消化法(1.5 mg/ml 膠原酶 I, 1 mg/ml 膠原酶-I in 0.1% BSA)

人類脂肪來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM-Low Glucose+MCDB201+ 2% FCS,DMEM+ 20% FBS,MesenproRS

5 人類羊水來源間充質干細胞

密度梯度離心、酶消化法處理羊水，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類羊水來源間充質干細胞分離

密度梯度離心,酶消化法 (0.25% 胰蛋白酶 +1.2 units/ml of dispase + 2 mg/ml 膠原酶I）

人類羊水來源間充質干細胞原代及傳代培養

a-MEM + 20% FBS, DMEMF12 + 10% FBS, high glucose DMEM + 20% hESC-defined FBS, KSR-based 培養基

6 人類牙髓來源間充質干細胞

酶消化法處理牙髓，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類牙髓來源間充質干細胞分離

酶法 (387.1 U/+mg 膠原酶+ 0.70 U/mg dispase II)

人類牙髓來源間充質干細胞原代及傳代培養

D-MEM-F12, a-MEM + 2% FCS

7 人類皮膚來源間充質干細胞

酶消化法處理皮膚組織，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類皮膚來源間充質干細胞分離

酶消化法 (0.6 U/ml dispase, 0.62 Wunsch U/ml Liberase Blendzyme 1,1.25 mg/ml 膠原酶 I)

人類皮膚來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM-F12 1 10/5/0.5% FBS, DMEM + 20% FBS

8 新生兒胎盤來源間充質干細胞

Ficoll 密度梯度離心、酶消化法處理胎盤，貼壁法原代培養間充質干細胞。

新生兒胎盤來源間充質干細胞分離

Ficoll 密度梯度離心, 酶消化法(1 mg/ml Dispase, 300 U/ml 膠原酶, 100 U/ml Hyalluronidase,

80 U/ml DNAse I, 0.25% 胰蛋白酶-EDTA)

新生兒胎盤來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM 低糖 + 20% FBS

9 人類唾液腺來源間充質干細胞

酶消化法處理唾液腺，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類唾液腺來源間充質干細胞分離

酶消化 (1.67 mg/ml 膠原酶+ 1.33 mg/ml hyaluronidase, 1.67 mg/ml dispase; 5.01 mg/ml 膠原酶2 + 3.99 mg/ml hyaluronidase,33.4 mg/ml dispase)

人類唾液腺來源間充質干細胞原代及傳代培養

DMEM + 10% FCS, DMEMF12 + 3% FBS

10 人類滑膜來源間充質干細胞

Ficoll–Paque 密度梯度離心、酶消化法處理滑膜，貼壁法原代培養間充質干細胞。

人類滑膜來源間充質干細胞分離

Ficoll–Paque 密度梯度離心, 酶消化法 (3mg/ml 膠原酶V)

人類滑膜來源間充質干細胞原代及傳代培養

a-MEM + 10% FBS, 20% FBS

小結：

不同來源的人間充質干細胞的分離方法：Ficoll–Paque 密度梯度離心、酶消化法、組織塊培養法

不同來源的人間充質干細胞的培養方法：不同的基礎培養基配比不同比例的胎牛血清。

名詞解釋

MSC SFM mesenchymal stem cell serum-free medium，間充質干細胞無血清培養基

Ficoll密度梯度離心 常用來分離人外周血單個核細胞（PBMC）的分層液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F／H)分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，平均分子量為400,000，當密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞，就可從外周血中分離到單個核細胞。Ficoll-Paque 分離液適用血液、骨髓和臍帶血來源的人單個核細胞分離（包括間充質干細胞）。

DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium是一種廣泛使用的基礎培養基，可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。

組織塊培養法 組織切成小塊，接種培養器皿培養細胞。

酶消化法 用胰蛋白酶和膠原酶等消化組織塊，分離細胞進行培養。

膠原酶 是一種蛋白酶，它能夠特異性的結合 Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸（X）和甘氨酸之間的肽鍵。該序列高頻率的存在于膠原中。膠原酶是*的一種可以降解廣泛存在于結締組織中的具有三股螺旋的天然膠原纖維的蛋白酶。

Hyaluronidase 透明質酸酶

Dispase 分散酶

DNAse 脫氧核糖核酸酶

相關產品

Ficoll 密度梯度分離液 Ficoll-Paque PREMIUM改良于Ficoll-Paque PLUS，后者作為一種從骨髓、外周血和臍帶血中高得率分離單個核細胞的無菌密度梯度介質已應用了三十多年。與Ficoll-Paque PLUS不同的是，Ficoll-Paque PREMIUM的生產是在嚴格控制環境下完成的, 生產條件符合ISO 13485:2003標準，GMP認證和美國藥典的建議，可用于生產細胞治療相關產品。細胞毒性等級為0。有RSF文件。

膠原酶 I 型膠原酶從溶組織梭菌制備，用于細胞和組織的解離。

間充質干細胞基礎培養基 Gibco MEM-α無酚紅基礎培養基可用于多種懸浮和貼壁的哺乳動物細胞，包括角化細胞、原代大鼠星形膠質細胞和人黑色素瘤細胞。

Gibco MEM-α谷氨酰胺基礎培養基廣泛用于哺乳動物細胞培養以及DHFR陰性轉染細胞選擇。

參考文獻

1 Dolly Mushahary, et al. Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.2017

2 人類間充質干細胞庫建設與管理規范，SZDB/Z 126-2015

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